使用奧林巴斯 CKX53 顯微鏡觀察大尺寸細胞,可參考以下方法:
奧林巴斯CKX53顯微鏡前期準備
樣本制備:將待觀察的大尺寸細胞制作成合適的裝片。如果是培養(yǎng)的細胞,可將細胞培養(yǎng)在蓋玻片上,待細胞貼壁生長良好后,用 PBS 等緩沖液輕輕沖洗,去除雜質(zhì),然后根據(jù)需要進行固定、染色等操作。若為組織樣本中的大尺寸細胞,需先將組織進行切片,切片厚度一般在 5-10 微米左右較為合適,然后進行脫蠟、水化及染色等處理,以便更好地觀察細胞結(jié)構(gòu)。
試劑準備:準備好觀察所需的試劑,如用于固定細胞的多聚甲醛、用于染色的蘇木精 - 伊紅(HE)染液、DAPI 染液等,以及用于封片的中性樹膠等。
顯微鏡調(diào)試:打開奧林巴斯 CKX53 顯微鏡電源,調(diào)節(jié)光源強度,使其適中。將顯微鏡的物鏡轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)至低倍物鏡(如 2x 或 4x)處,調(diào)節(jié)焦距旋鈕,使載物臺上升到合適位置,準備放置樣本。
奧林巴斯CKX53顯微鏡觀察步驟
低倍鏡觀察:將制備好的樣本裝片放在載物臺上,用壓片夾固定好。通過目鏡觀察,同時調(diào)節(jié)粗準焦螺旋,使載物臺緩慢下降,直到在視野中看到清晰的細胞圖像。使用低倍鏡可以觀察到細胞的整體形態(tài)和分布情況,找到需要進一步觀察的大尺寸細胞。移動載物臺,將目標細胞移至視野中央。
中倍鏡觀察:將物鏡轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)至中倍物鏡(如 10x 或 20x),此時需重新調(diào)節(jié)焦距,可先使用粗準焦螺旋大致找到細胞圖像,再用細準焦螺旋進行微調(diào),使圖像更加清晰。在中倍鏡下可以更清楚地觀察到細胞的細節(jié)結(jié)構(gòu),如細胞核、細胞質(zhì)的大致形態(tài)等。進一步調(diào)整光源亮度和對比度,使細胞結(jié)構(gòu)更加清晰可見。
高倍鏡觀察:如果需要觀察更細微的結(jié)構(gòu),可將物鏡轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)至高倍物鏡(如 40x)。由于高倍物鏡的工作距離較短,在轉(zhuǎn)換物鏡時要特別小心,避免物鏡碰到樣本裝片。轉(zhuǎn)換后,僅使用細準焦螺旋進行微調(diào),以獲得清晰的圖像。在高倍鏡下可以觀察到細胞內(nèi)的細胞器、細胞膜的細節(jié)等結(jié)構(gòu)。
奧林巴斯CKX53顯微鏡觀察記錄
繪圖記錄:可以準備好繪圖工具,在觀察過程中,根據(jù)看到的細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),用鉛筆在紙上進行繪圖記錄,標注出細胞的各個結(jié)構(gòu)和特征。
拍照記錄:奧林巴斯 CKX53 顯微鏡一般可配備成像系統(tǒng),可通過成像軟件進行拍照記錄。在拍照時,要調(diào)整好圖像的亮度、對比度、色彩等參數(shù),確保拍攝到的圖像清晰、準確地反映細胞的真實形態(tài)。
奧林巴斯CKX53顯微鏡注意事項
保持載物臺和鏡頭清潔:在觀察過程中,要避免樣本液體污染載物臺和物鏡鏡頭。如果有液體濺出,應及時用干凈的擦鏡紙擦拭干凈。
避免過度調(diào)節(jié):在調(diào)節(jié)焦距和光源等參數(shù)時,要注意不要過度調(diào)節(jié),以免損壞顯微鏡或影響觀察效果。
注意物鏡使用順序:一般按照從低倍鏡到高倍鏡的順序進行觀察,這樣可以更容易地找到目標細胞,并避免在高倍鏡下因視野過小而難以找到細胞。